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標本的搜集是成功進行elisa試劑盒實驗重要基礎,我司為您揭秘ELISA試劑盒實驗標本的搜集以及常見問題的解析。
實驗標本搜集:
1)標本搜集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗,若不能馬上進行實驗,可將標本放于-20℃保存,但應防止反復凍融。
2)血清:運用不含熱原的試管,操作過程中防止任何細胞刺激,搜集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心腸別離。
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3)血漿:3000轉離心30分鐘取上清。
4)細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
5)組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,3000轉離心10分鐘取上清。
6)保存:假如樣本搜集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,防止反復凍融,在室溫下解凍并保證樣品均勻地充沛解凍。
ELISA試劑盒常見問題解析:
1.加樣量紛歧致?
解決方法:樣品稀釋前應充沛混勻,盡可能運用同一移液器并裝緊吸嘴。
2.樣品數(shù)量多少紛歧,加樣時刻有長有短?
解決方法:重復某一樣品時,加樣時刻盡可能與*次接近。
3.保溫時刻紛歧致,洗刷條件紛歧致,操作人員紛歧致?
解決方法:重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與前次保持一致,以掃除這些要素造成的紛歧致的可能性。
引起ELISA測定過錯成果的原因主要有:
①標本要素;
②試劑要素;
③操作要素。
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響要素較多,而且其操作中有必定的技術要求,在檢測過程中除正常反響外,有經常見到一些過錯的成果。