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    上海研域生物小鼠ELISA試劑盒各環(huán)節(jié)中常見問題及解決方法

    發(fā)布時(shí)間: 2024-04-17  點(diǎn)擊次數(shù): 517次

    小鼠ELISA試劑盒以期給同行帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,


    下面分析
    小鼠ELISA試劑盒試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法

    一、選擇試劑

    選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。


    小鼠ELISA試劑盒



    二、加樣

    可能原因:

    1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣; 2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。

    解決辦法:

    1,標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。

    2,加樣后及時(shí)放入孵箱。

    3,加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。

    4,如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。

    5,ELISA試劑盒標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。

    三、 孵育

    可能原因:

    1,孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗che底;

    2,孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗che底。

    解決辦法:

    1,貼封片或加蓋;

    2,按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。

    四、洗板

    可能原因:

    1,采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。

    2,采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不che底;洗板針堵塞,抽吸不wan全;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。

    3,反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。

    解決辦法:

    1,ELISA試劑盒保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后zui hao在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;

    2,合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。


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