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大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒 Rat cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit ,規(guī)格:96T/48T,產品別名: 大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)檢測試劑盒
大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒原理的簡要說明書:cAMP(環(huán)磷腺苷)。環(huán)磷腺苷是細胞內的重要調節(jié)物質,是葡甲胺作為配基與環(huán)磷酸腺苷(cAMP)結合在一起,通過增強cAMP的脂溶性,提高了cAMP的純度,易于透過細胞膜,使cAMP的藥理作用得到zui大限度的發(fā)揮。cAMP以微量廣泛存在于動植物細胞及微生物中,是代謝調節(jié)控制的重要因子之一。在生物體內由腺苷三磷酸通過腺苷酸環(huán)化酶的催化而形成。
大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒操作步驟
1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。
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