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不論是正常發(fā)育還是疾病發(fā)展,細(xì)胞凋亡(或稱為程序性細(xì)胞死亡)都是一個重要的過程,因此它也受到了研究者們的廣泛關(guān)注。DNA段化是細(xì)胞凋亡的一個顯著標(biāo)志,而ELISA試劑盒分析是檢測DNA段化的一個常用技術(shù)。
ELISA分析的全名是脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法,其原理是染色體DNA斷裂時會產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端,生物素或熒光素標(biāo)記的dUTP可在TdT的作用下?lián)饺氲紻NA的3'-末端,隨后被顯色系統(tǒng)檢測出來。
ELISA試劑盒分析的檢測方法取決于分子標(biāo)簽的特性。舉例來說,對于標(biāo)記有綠色或紅色熒光分子的DNA來說,需要用到熒光計、顯微鏡或其他熒光檢測設(shè)備。如果對象是懸浮細(xì)胞,還可以使用流式細(xì)胞儀。對于生物素標(biāo)記的DNA而言,可通過鏈酶親和素-辣根過氧化酶進(jìn)行檢測,這一系統(tǒng)產(chǎn)生的顯色或發(fā)光信號需要用到光度計。
ELISA試劑盒EMD Millipore的TUNEL分析產(chǎn)品包括:可用于石蠟包埋組織、冰凍組織切片、細(xì)胞懸液和貼壁細(xì)胞的ApopTag® ISOL雙熒光凋亡檢測試劑盒;對懸浮細(xì)胞進(jìn)行流式分析的Apo-Direct TUNEL分析試劑盒;以及ApopTag過氧化物酶原位凋亡檢測試劑盒。