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1. 如何貯存和凍結(jié)ATCC細(xì)胞才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
答:將國產(chǎn)血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但有必要注意的是,融解過程中有必要規(guī)矩地?fù)u晃均勻。長時刻貯存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而構(gòu)成沉積或可見的混濁。因而,推薦在-20℃以下貯存血清,并防止反復(fù)凍融。主張血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,主張無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
2. ATCC細(xì)胞中包含絮狀沉積,它們是什么,怎樣處理?
答:沉積包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除掉沉積,離心血清(400g,1-2分鐘)或許簡單的讓其沉積在瓶子底部,將血清當(dāng)心的 轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不主張選用過濾的辦法除掉沉積,由于沉積會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉積并加熱至37℃就會再溶解。所以,運(yùn)用 產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃,沉積會天然消失。
3. 如何防止ATCC細(xì)胞中發(fā)作沉積?
答:按如下操作可防止沉積的發(fā)作:
(1)凍結(jié)血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,削減沉積的發(fā)作。
(2)血清分裝凍存時,須規(guī)矩?fù)u晃均勻(當(dāng)心勿形成氣泡),使溫度與成分均一。
(3)勿直接由-20℃直接至37℃凍結(jié),因溫度改變太大,簡單形成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)作沉積。
(4)勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得污濁,一起血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因而受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。
(5)血清的熱滅活非常簡單形成沉積物的增多,若非必要,能夠無須做此步驟。
(6)若有必要做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時刻過久或搖晃不均勻,都會形成沉積物的增多。
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